BellBrook Transcreener cGAMP cGAS檢測試劑盒方案

cGAS及cGAS-STING通路

cGAS-STING信號通路最初是作為天然免疫系統的一個重要組成部分被發現,其功能是檢測胞漿DNA的存在,并在反應中觸發炎癥基因的表達。DNA通常存在于細胞核中,異常在胞漿中定位的DNA與腫瘤的發生或病毒感染有關,環狀GMP-AMP合成酶(cyclic GMP-AMP Synthasec,cGAS)感知到本不應出現在細胞質的DNA時,會催化GTP和ATP之間發生化學反應并生成一種被稱為環鳥腺苷酸(cvclic GMP-AMP cGAMP)的小分子,該小分子作為先天免疫系統的信使,會進一步激活免疫反應。因比,cGAS就像一個防盜報警器,cGAMP則是防盜報警器產生的電信號。cGAMP結合并激活STING,后者是一種作為細胞對異常胞漿DNA作出免疫應答的關鍵組分的跨膜接頭蛋白,STING被激活后隨TBK1從內質網一起轉位至核周內體。TBK1激酶磷酸化并激活干擾素調節因子(IRFs)和NF-KB,后者誘導Ⅰ型干擾素和其他免疫應答基因。

 

cGAS及cGAS-STING通路

 

2013年發現cGAS后不久,自我DNA的異常激活被證明是導致衰弱甚至致命的自身免疫性疾病的基礎,如系統性紅斑狼瘡(SLE)和Aicardi–Goutieres綜合征(AGS)。動物模型中的敲除研究清楚地表明,抑制cGAS是一種有希望的治療干預方法,使得cGAS成為近些年熱門的先天免疫靶點的酶。這里給大家帶來全球領先先導藥物高通量篩選專家BellBrook研發的cGAS抑制劑高通量篩選工具——Transcreener cGAMP cGAS檢測試劑盒,可助力全球制藥和生物技術公司、CRO和學術實驗室加速藥物發現。

 

Transcreener cGAMP cGAS檢測法通過測定生成的cGAMP來測定cGAS酶的活性。通過檢測cGAMP輸出,該方法提供了一種實時評估任何cGAMP產生酶活性的通用方法。Transcreener cGAMP檢測技術使用了一種簡單但高效的方法,包括cGAMP特異性抗體搭配遠紅熒光的示蹤劑。反應中產生的cGAMP與示蹤劑競爭,改變熒光特性并提供熒光讀出。cGAS分析可用于熒光偏振(FP)時間分辨-熒光共振能量轉移(TR-FRET)兩種方式進行檢測~

熒光偏振(FP)法原理示意圖
熒光偏振(FP)法原理示意圖
時間分辨-熒光共振能量轉移(TR-FRET)法示意圖
時間分辨-熒光共振能量轉移(TR-FRET)法示意圖

 

參考用途:

  • cGAS酶活性檢測
  • 篩選cGAS抑制劑化合物庫
  • 量化抑制劑效力
  • 確定cGAS-抑制劑滯留時間

 

相關實驗驗證數據請參見:

Targeting the cGAS-STING Pathway Using a Homogenous, HTS Compatible Transcreener? cGAS Assay

 

Transcreener cGAMP cGAS試劑盒優勢:

Transcreener cGAMP cGAS試劑盒
操作簡便,高通量,兼容96, 384和1536孔模式~
Transcreener cGAMP cGAS試劑盒
出色的信號穩定性:24小時以上的信號依舊穩定性

 

產品性能展示:

cGAS由雙鏈DNA激活 cGAS和?cGAMP?線性
cGAS由雙鏈DNA激活,需要ATP和GTP底物來生產cGAMP cGAS和?cGAMP?線性
第一步輕松高通量篩選處化合物庫 后續通過劑量反應確定抑制劑效力
第一步輕松高通量篩選處化合物庫 后續通過劑量反應確定抑制劑效力
cGAS被dsDNA激活 ATP和GTP依賴
cGAS被dsDNA激活 ATP和GTP依賴

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Transcreener cGAMP cGAS試劑盒組分:

組分 描述
cGAMP Antibody 二核苷酸cGAMP特異的抗體。
Tracer 熒光的變化可以在FP或TR-FRET中讀取
Stop & Detect Buffer B, 10X 一種可以用來終止酶反應的緩沖液,用于終點法讀數
ATP ATP可用于酶反應和標準曲線
GTP GTP可用于酶反應和標準曲線
cGAMP 標準品
Interferon Stimulatory DNA ISD是一種45-bp的低聚物,用于激活cGAS酶

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需要自備的試劑及儀器:

名稱 描述
cGAS酶 cGAS(Cat# 2227)可以從艾美捷購買。
酶緩沖液 我們通常使用含有20 mM TRIS (pH 7.5), 5 mM MgCl2, 0.01% Brij-35和1% DMSO(測試化合物的溶劑)的酶緩沖液,使用最適合你的酶條件的緩沖液。
檢測用板子 FP?格式:黑色板子,推薦康寧384孔板(Cat# 4514)
TR-FRET格式:白色板子,推薦康寧384孔板(Cat #4513)
均可從艾美捷購買~
讀板器 需要能檢測熒光偏振或者TR-FRET的讀板器
移液器 使用液體處理設備,可以精確分配亞微升體積到384孔板。
超純水 一些去離子水系統被核酸酶污染,核酸酶可以降解核苷酸底物和產物,降低了檢測性能。小心處理和使用超純水可以消除這個潛在的問題

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相關產品推薦:

類別 貨號 名稱 規格
熒光偏振法的試劑盒 3024-1K Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (1,000 Assay, 384 Well) 1000 Assay
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3024-100K Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well) 10X10000 Assay
TR-FRET法的試劑盒 3025-1K Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (1,000 Assay, 384 Well) 1000 Assay
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cGAS 2227 Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human, Full-Length, 10 μg 10 μg
2228 Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human,?Full-Length,?100 μg 100 μg
cGAS酶+試劑盒 3024-1K-B Includes Transcreener cGAS FP Assay 1K Kit and 20 μg Human cGAS Enzyme 1000 Assay+20 μg
3024-10K-B Includes Transcreener cGAS FP Assay 10K Kit and 200 μg Human cGAS Enzyme 10000 assay+200 μg
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3025-10K-B Includes Transcreener cGAS TR-FRET Assay 10K Kit and 200 μg Human cGAS Enzyme 10000 assay+200 μg
3024-1K-B Includes Transcreener cGAS FP Assay 1K Kit and 20 μg Human cGAS Enzyme 1000 Assay+20 μg
黑色板子 2233 Corning 96-Well Black Assay Plates (#3686), 3-Pack (200+ Assays) 3-Pack
2229 Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 3-Pack (1,000+ Assays) 3-Pack
2230 Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 30-Pack (10,000+ Assays) 30-Pack
白色板子 2234 Corning 96-Well White Assay Plates (#3642), 3-Pack (200+ Assays) 3-Pack
2231 Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 3-Pack (1,000+ Assays) 3-Pack
2232 Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 30-Pack (10,000+ Assays) 30-Pack

Note:以上產品僅用于科研,不能用于醫療及診斷~

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來源:cGAS-STING通路新助力——高通量cGAS抑制劑篩選(試劑盒)工具

 

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艾美捷科技與國內外優秀的生物試劑供應商優保持著密切的合作關系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:AAT Bioquest、Abbexa、Abnova、Agrisera、Atlas Antibodies、BellBrook、Biomatik、Biosensis、BioVendor、CalBioreagents、Cayman Chem、Cell Biolabs、Columbia Biosciences、Crystal Chem、Cytoskeleton、DIAsource、Duchefa、Ebba Biotech、Echelon Biosciences、ECM Biosciences、Enzo Life Sciences、Epigentek、Equitech-Bio、FabGennix、G-Biosciences、GeneCopoeia、Hycult Biotech、ichorbio、Icosagen、Immundiagnostik、ImmunoReagents、IQ Products、Jackson、LC Labs、LifeSensors、Lumiprobe、Mabtech、Matreya、Medkoo Biosciences、MyBioSource、Nanoprobe、Norgen Biotek、ProSci、ProSpec、ReliaTech、Rockland、SouthernBiotech、StressMarq、SySy、TRC、US Biological、Worthington?等,可以在短時間內為用戶提供專業的前沿資訊、完備的產品及物流服務。

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